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冷凍電鏡是什么

更新時間:2024-04-29瀏覽:1792次

冷凍電鏡應用場景:

晶體結構解析。
絕對構型判定。
鹽與共晶區(qū)分。
混合物組分結構測定。
同分異構確定。
冷凍電子顯微鏡技術簡稱冷凍電鏡:應用冷凍固定技術,低溫下使用投射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術,從而得到生物大分子的結構。
電鏡觀察:樣品經(jīng)過超低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣(噴金/噴碳)等處理后,通過冷凍傳輸系統(tǒng)放入電鏡內(nèi)的冷臺即可進行觀察。其中,快速冷凍技術可使水在低溫狀態(tài)下呈玻璃態(tài),減少冰晶的產(chǎn)生,從而不影響樣品本身結構,冷凍傳輸系統(tǒng)保證在低溫狀態(tài)下對樣品進行電鏡觀察。
1968年,AronKlug發(fā)現(xiàn)中心截面定理,提出可以通過三維物體不同角度的二維投影在計算機內(nèi)進行三維重構來解析獲得物體的三維結構。根據(jù)這一原理,利用透射電鏡獲得生物樣品多個角度的放大電子顯微圖像,即有可能在計算機里重構出它的三維空間結構。在冷凍電子顯微學結構解析的具體實踐中,依據(jù)不同生物樣品的性質及特點,可以采取不同的顯微鏡成像及三維重構方法。
目前主要使用的幾種冷凍電子顯微學結構解析方法包括:電子晶體學、單顆粒重構技術、電子斷層掃描重構技術等,它們分別針對不同的生物大分子復合體及亞細胞結構進行解析。

 

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